作为一个微生物学博士,虽然做的是基因水平的一些研究,但是以前痛苦的微生物筛选以及培养工作的经历仍历历在目。
我做的是细菌的产酸代谢过程。下面我就自己做实验的一些建议说一下:
第一,细节生长观测。
一般配置好的培养基是澄清的,灭菌后,接种细菌,置于无菌摇床,震荡。通常情况下,如果细菌接种成功,培养基会变浑浊,甚至还有可能看到明显的菌体团结,沉淀。
第二,细菌计数方法。
细菌计数方法主要有3种。
1.计数器法
采用血细胞计数器进行计数。取一定体积的菌悬液置于细胞计数室内,用显微镜观察计数。由于计数室的容积是固定的,一般为0.1m3,因此,根据计数器刻度内的细菌数可以估算菌悬液重大概细菌数。
2.活细胞数记数法
此法主要上课根据每个活细胞能长出一个菌落的原理设计的。取一定体积菌悬液,制备不同浓度梯度的菌悬液,然后涂布在固体培养基上,恒温培养1-2d,观察平板上菌落生长情况,计算菌落个数。
3.OD600法
测定菌悬液在600nm处吸光值,用OD600的值表示细菌浓度大小。OD600越大,细菌浓度越高。
希望对你有用
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